Ksantoproteinovaya reakcija na protein: znaki in formulo enačba

Da se vzpostavi kakovostno sestavo mnogih živil, ki se uporabljajo ksantoproteinovaya reakcijo na beljakovine. Prisotnost aromatskih aminokislin v mešanici bo spremenila v pozitivnem barvo preskusnega vzorca.

Kaj je protein

To se imenuje tudi protein, ki je gradbeni material za živega telesa. Beljakovine ohranjanje mišične mase, obnovite poškodovane in mrtve strukture tkiv različnih organov, pa naj bo to las, kože in vezi. Z njihovo udeležbo, proizvaja rdeča krvna telesca, ureja normalno delovanje številnih hormonov in sistemskih celic imunskega sistema.

To je kompleksna molekula, ki je polipeptid, ki ima maso večjo od 6 ~ 10 ³ daltoni. Beljakovine oblikujejo strukturo aminokislinskih ostankov številnih vezane peptidne vezi.

Struktura proteinov

Posebnost te snovi v primerjavi z nizkimi peptidi molekulsko maso, ki so razvili tridimenzionalno prostorske strukture, podprte učinke z različnimi stopnjami privlačnosti. Beljakovine imajo štiri-strukturo. Za vsako od njih ima svoje značilnosti.

Kot osnovi primarnega ureditve molekul pridobljenih aminokislinsko zaporedje, strukturo, ki prepozna ksantoproteinovaya reakcijo proteina. Ta struktura je periodično ponavljanje peptidno vez -HN-CH-CO-, selektiven ostanki deli so stranske verige aminokislin. Oni določijo dodatne lastnosti snovi kot celote.

Primarna struktura proteinov velja dovolj močna, da je to posledica prisotnosti močne kovalentne interakcij v peptidnih vezi. Nastanek naslednjih stopnjah se zgodi, odvisno od lastnosti, določenih v začetni fazi.

Nastanek sekundarne strukture je mogoče zaradi zvijanje aminokislinske sekvence v spiralo, v kateri so sedež vodikove vezi med zavoji.

Terciarno organizacija raven molekul tvorjen z uporabo enega od spiralo na drugih fragmentov z nastankom vseh možnih povezav med njimi, z vodikom disulfid, kovalentnimi ali ionske spojine. Rezultat je združenje v obliki kroglic.

Prostorska ureditev terciarnih struktur s tvorbo kemijskih vezi med njimi pripelje do tvorbe končne oblike molekule ali kvaternimi nivojih.

aminokisline

Ti povzročijo kemijske lastnosti proteinov. Obstaja približno 20 večjih aminokisline, ki tvorijo polipeptide v drugačnem zaporedju. To tudi imenujemo redka aminokarboksilne kisline v obliki hidroksiprolina in hidroksilizin izveden osnovni peptid.

Kot znak proteina reakcije priznavanje ksantoproteinovaya, prisotnost določenih aminokislin omogoča spreminjanje barve reagentov, kar kaže na prisotnost specifičnih struktur v njihovo sestavo.

Kot se je izkazalo, da so karboksilne kisline, ki se pojavljajo zapušča atoma vodika na amino skupino.

Primer strukturo molekule lahko služi tudi strukturno formulo glicin (HNH- HCH- COOH) kot najpreprostejši aminokislino.

V tem primeru je eden izmed vodikov CH ₂ - se lahko nadomesti z ogljikom več radikalom, ki vsebuje benzenski obroč, amino, sulfo, karboksi.

Kaj ksantoproteinovaya reakcijo

Za kvalitativno analizo proteinov z uporabo različnih tehnik. Ti vključujejo reakcije:

• biureta s pojavom vijoličaste barve;
• ninhidrinom da se tvori raztopina modrovijolicasta;
• formaldehid z vzpostavitvijo rdeči barvi;
• Nogier da se obori sivo-črne barve.

Pri izvajanju vsaka metoda izkazala prisotnosti beljakovin in prisotnost določenih funkcionalnih skupin v svoji molekuli.

Tukaj ksantoproteinovaya reakcija na protein. To se imenuje tudi razčlenitev Mulder. Nanaša se na barvne reakcije za proteine, v katerih so aromatskih in heterocikličnih aminokislin.

Značilnost takega postopka vzorčne je nitriranje kislina dušikovega ostanki ciklični aminokislinskih zlasti pristopu nitro skupine na benzenov obroč.

Rezultat tega postopka je tvorba nitro spojine, ki oborina. To je osnovna funkcija ksantoproteinovaya reakcija.

Kaj določeno aminokislino

Niso vsi aminokarboksilne kisline odkrita tak vzorec. Bistvo reakcije detekcije ksantoproteinovaya proteinov - prisotnost benzenov obroč ali heterociklični obroč v molekuli aminokislin.

Ker je protein izoliran iz aminokarboksilnih kislin dveh aromatskih, v katerem je fenilna skupina (fenilalanina), in hidroksifenil ostanek (v tirozina).

Z je ksantoproteinovaya Reakcijsko določi heterociklične amino triptofan sekvenco, indola, ki ima aromatsko jedro. Prisotnost gornjih spojin v proteinu daje značilno barvo spremembo testnega okolja.

Kaj uporaba reagenti

Za izvedbo reakcije ksantoproteinovaya treba pripraviti 1% raztopine jajčnega proteina ali rastlinskega izvora.

Običajno se uporablja jajce, ki je razdeljen nadaljnje ločevanje beljakovin iz rumenjaka. Pri 1% raztopini proteina smo razredčili v količini desetkrat prečiščene vode. Po razpadu izhaja tekočine proteinske treba filtrirali skozi več plasti gaze. Ta rešitev je treba hraniti na hladnem.

Možno je, da reakcijo izvedemo z rastlinskih beljakovin. Za pripravo raztopine se uporablja pšenične moke v količini 0,04 kg. 0,16 l očiščene vode. Sestavine zmešamo v bučo, ki je vezano za 24 ur v hladnem prostoru pri temperaturi od okoli + 1 ° C Ob koncu dneva smo mešali raztopino, čemur sledi filtracija njegov prvi z vato in potem - papir prepognjen filtra. Nastalo tekočina je bila shranjena v hladnem prostoru. Ta rešitev je predvsem prisotna v frakciji albumina.

Za izvedbo reakcije ksantoproteinovaya kot glavnega reagenta uporabimo dušikove kisline konc. Nadaljnji reagenti je raztopina 10% natrijevega hidroksida ali amoniaka, raztopine želatine in nekoncentriranem fenola.

Metodologija od

V čisto cev je izdelana 1% raztopina proteina -tega jajca ali moke v količini 2 ml. Temu se doda okoli 9 kapljic koncentrirane dušikove kisline, da flokulacija ustavil. Nastalo zmes smo segrevali, nastalo rumeno oborino postopno izgine in njegova barva preide v raztopino.

Ko tekočina ohladi v cevi vzdolž stene dodamo približno 9 kapljic natrijevega hidroksida, koncentriramo, ki je presežek za postopek. Reakcijski medij postane alkalna. Vsebina postane oranžne barve v epruveti.

značilnosti

Ker ksantoproteinovaya imenuje kvalitativno reakcijo dušikove kisline z učinkovanjem proteinov, se vzorec izvajamo pri vključeno digestoriju. Upoštevajte vse varnostne ukrepe pri delu s koncentriranimi jedkih snovi.

Med procesom segrevanja, ki jih je treba upoštevati pri pritrjevanje na nosilec in izberete naklon lahko pride do sproščanja vsebine iz tube.

Izbiranje koncentrirane dušikove kisline in natrijevega hidroksida treba le s stekleno pipeto in hruške gumijasto prepovedana pipeto v usta.

Relativna reakcijo s fenolom

Zaradi jasnosti postopka in potrditev prisotnosti fenilnih skupin izvedemo s podobnim vzorcem hidroksibenzen.

Cev izdelavo 2 ml razredčenega fenola, nato postopoma vzdolž stene, dodamo 2 ml koncentrirane dušikove kisline. Raztopino smo podvrgli ogrevanje, pri čemer postane rumena. Ta reakcija je kakovost prisotnosti benzenov obroč.

Postopek hidroksibenzen nitriramo z dušikovo kislino, ki ji sledi tvorba zmesi p-nitrofenol in o-nitrofenola v odstotku 15 do 35.

Preskus Primerjava z želatino

Kot dokaz, da ksantoproteinovaya reakcija na protein razkriva aminokislino z aromatskim strukture, uporaba beljakovine, ki nimajo fenolno skupino.

V čisto cev je izdelana 1% raztopino z želatino v količini 2 ml. Temu se doda okoli 9 kapljic koncentrirane dušikove kisline. Dobljeno zmes segrejemo. Rešitev ni bila obarvana rumeno, kar dokazuje odsotnost aminokislin z aromatsko strukturo. Včasih je rahlo rumeno okolja zaradi prisotnosti proteinskih nečistoč.

kemijske enačbe

V dveh korakih reakcije teče ksantoproteinovaya proteine. Formula prvi stopnji postopka nitriranje opisuje molekule amino kisline ob uporabi koncentrirane dušikove kisline.

Primer je pritrditev nitro skupine v tirozin, da se tvori nitrotirozina in dinitrotirozina. V prvem primeru na benzenov obroč vezan en _NO2 -radical in druga spojina ima dva atoma vodika nadomestita z _NO2. Kemijska formula ksantoproteinovaya tirozin reakcijo z reakcijo z dušikovo kislino, da se tvori nitrotirozina molekulo.

Postopek Nitriranje spremlja prehodno brezbarvno obarvanosti v rumenem tonu. Pri izvedbi te reakcije s proteini, ki vsebuje aminokislinske ostanke fenilalanin ali triptofan, in barvo sprememb raztopine.

Drugi korak je reakcijski produkt nitriranje tirozin molekul, zlasti nitrotirozina, z amonijem ali natrijevega hidroksida. Rezultat je natrijeva ali amonijeva sol, pri kateri barva rumeno-oranžne. Takšna reakcija je povezana z možnostjo nitrotirozina molekul premakniti v quinoid obliki. Nato soli tvorjena iz njih nitronic kislino, ki ima kinonskega sistema konjugiranih dvojnih vezi.

Tako se konča ksantoproteinovaya reakcijo na proteine. Enačba predstavljeni zgoraj drugem koraku.

Rezultati

Med analizo tekočin, ki jih vsebujejo tri cevi, je referenčna raztopino razredčimo s fenolom. Snovi z benzenskim obročem dobimo kvalitativno reakcijo z dušikovo kislino. Kot rezultat, se spremeni barvo raztopine.

Kot je znano, želatina obsega hidroliziran obliko kolagena. Protein ne vsebuje aromatski strukturo aminokislin. Št sprememba barve gojišča z reakcijo s kislino.

V tretjem epruveto obstaja pozitivna reakcija na proteine ksantoproteinovaya. Zaključek je mogoče pripraviti kot sledi: vsi proteini z aromatsko strukturo, pa naj gre za fenilno skupino ali indolni obroč, glede na spremembo barve raztopine. To je posledica tvorbe nitro spojine z rumeno barvo.

Izvedba barvno reakcijo dokazuje prisotnost različnih kemijskih struktur v aminokislin. PRIMER želatina kaže, da njegova sestava obsega aminokarboksilne kisline, ki nima fenilno skupino ali ciklično strukturo.

Z ksantoproteinovaya reakcijo lahko razložimo z rumeno obarvanje kože, kadar deluje nanjo močno dušikove kisline. Enake barve bodo v času njenega podobno analizo postala Penina mleko.

V klinični laboratorijski praksi je ta barva vzorec ne uporabljajo za odkrivanje proteina v urinu. To je zaradi rumene barve samega urina.

Ksantoproteinovaya reakcija postala bolj uporablja za kvantifikacijo aminokislin kot sta triptofan in tirozin, kot del različnih proteinov.